| Titel |
Genetische Werkzeuge zur gezielten und akuten Proteindepletion
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| Title |
Genetic tools for targeted and acute protein depletion |
| Schwerpunkt/Focus |
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| Sprache/Language |
optional |
| VV-Nr./Course No. |
132062 |
| Modulverantwortlich/Responsible |
Prof. S. Büttner |
| Vertreter/Co-responsible |
Dr. L. Habernig |
| Anbieter/Teachers |
Prof. S. Büttner, Dr. F. Bröskamp, Dr. L. Habernig |
| Typ/Type |
Seminar + Praktikum |
| SWS/Semerster periods per week |
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| Arbeitslast(h)/Work load |
150 h |
| KP/Credit points |
5 KP |
| Zuordnung/Classification |
Fortgeschrittenen-Modul (Advanced Module) |
| Semester/Semester |
WiSe |
| Studierende/Students |
MSc Biowissenschaften
MSc Biotechnologie
MSc Molekulare Biomedizin |
| Corona-Informationen/Corona-Information |
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| Zeit/Date |
Block II: 24.11-19.12.2025 |
| Ort/Location |
Räume der AG Büttner |
| Beginn/Start |
Vorbesprechung AG Buettner |
| Vorbesprechung/Obligatory pre-meeting |
19.11.25 von 9-10 Uhr |
| Voraussetzung/Prerequisite |
keine |
| Anmeldung/Registration |
Fortgeschrittene-Module: Online-Anmeldung |
| Leistungskontrollen/Performance assessments |
Mitarbeit, Präsentation |
| Termine f. Leistungskontrollen/Date for performance assessments |
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| max. NP/Max. grade points |
200 NP |
| Ziele/Aims |
Im Rahmen des Moduls sollen verschiedene Methoden zur Regulierung der Genexpression verglichen werden. Durch das gezielte Targeting lipidstoffwechselrelevanter Enzyme wird deren Einfluss auf den Lipidstoffwechsel der Hefe untersucht. |
| Inhalte/Content |
Das Erstellen eines Gen-Knockouts in Hefe dauert nur wenige Tage und stellt eine Standardmethode in der Hefezellbiologie dar. Diese klassische Knockout-Strategie ist jedoch mit Einschränkungen verbunden. So können beispielsweise essentielle Gene nicht ausgeschaltet werden, und selbst der Verlust nicht-essenzieller Gene kann langfristig zur Selektion von Sekundärmutationen führen, die den Ausfall des fehlenden Genprodukts funktionell kompensieren.
Um diese Limitationen zu umgehen, wurden regulierbare Expressionssysteme entwickelt, die eine zeitlich und funktionell präzisere Kontrolle erlauben. Der Austausch des endogenen Promotors gegen einen Doxycyclin-reprimierbaren Promotor ermöglicht etwa ein reversibles und induzierbares Abschalten der Transkription. Ergänzend dazu können Auxin-induzierbare Degrons eingesetzt werden, um Proteine gezielt und schnell dem zellulären Abbau zuzuführen. Diese Ansätze eröffnen einen differenzierten Zugang zur Untersuchung dynamischer Prozesse im Lipidstoffwechsel und erlauben es, akute und chronische Effekte genetischer Manipulationen zu vergleichen.
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| Methoden/Methods |
Polymerase-Kettenreaktion (PCR), Transformation von DNA in Hefezellen, Proteinanalyse mittels SDS-PAGE und Western Blot, Durchflusszytometrie und Fluoreszenzmikroskopie. |
| Berufsrelevante und interdisziplinäre Komponenten/Occupational and interdisciplinary skills |
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| Voraussetzung für/Prerequisite for |
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| Präsenzpflicht/Compulsory presence |
ja |
| Plätze/Number of participants |
4 |
| Gruppengröße/Group size |
1-2 |
| Materialien/Materials |
Labormantel |
| Literatur/Literature |
wird im Seminar besprochen |
| Links |
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| Sonstiges/Further information |
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= Modul gehört zum SPP Imoplant / Module is part of the SSP Imoplant
= Modul gehört zum SPP Evolution /Module is part of the SSP Evolution
= Modul gehört zum SPP Bioanalytics and Biochemistry /Module is part of the SSP Bioanalytics and Biochemistry
= Modul gehört zum SPP Neuroscience and Behaviour /Module is part of the SSP Neuroscience and Behaviour
= Modul gehört zum SPP Quantitative Cell Biology /Module is part of the SSP Quantitative Cell Biology